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貼壁細(xì)胞的應(yīng)用
貼壁細(xì)胞培養(yǎng)是生命科學(xué)領(lǐng)域中常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)之一，它可以應(yīng)用于多種場(chǎng)景，包括但不僅限于:
1.藥物篩選:通過(guò)培養(yǎng)貼壁細(xì)胞，可以測(cè)試藥物的療效和毒性，從而篩選出具有治療潛力的藥物。
2.細(xì)胞學(xué)研究:貼壁細(xì)胞培養(yǎng)可以為細(xì)胞學(xué)研究提供許多有用的信息，例如細(xì)胞分裂、分化和轉(zhuǎn)化等
3.疾病模型:通過(guò)培養(yǎng)患者的貼壁細(xì)胞，可以建立與某些疾病相關(guān)的細(xì)胞模型，例如癌癥。
4.基因編輯:貼壁細(xì)胞培養(yǎng)可以為基因編輯提供重要的支持，例如CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)。
總之，貼壁細(xì)胞培養(yǎng)一項(xiàng)非常重要的生命科學(xué)技術(shù)，可以應(yīng)用于許多不同的場(chǎng)景和研究領(lǐng)域。
使用指南
接種細(xì)胞懸液
1.細(xì)胞懸液混勻:按照實(shí)驗(yàn)要求的濃度準(zhǔn)備細(xì)胞，在培養(yǎng)基瓶、培養(yǎng)瓶或其他容器中混勻。建議的工作容積為每層30-50 mL.
2.用移液管緊貼瓶壁緩慢地將液體加到五層細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，避免產(chǎn)生泡沫或者氣泡(每次加液時(shí)移液管內(nèi)液體可留少許)。
注意事項(xiàng): 10 ml移液管可以伸到培養(yǎng)瓶底部使培養(yǎng)基分散開(kāi)，而25 mL移液管則只能伸到NEST標(biāo)志的地方把液體分散開(kāi)。
3.把培養(yǎng)瓶有NEST標(biāo)志那一側(cè)朝向自己，順時(shí)針做斜45度左右放置一段時(shí)間，使瓶中各個(gè)隔層的液體達(dá)到平街。
4.輕緩地將培養(yǎng)瓶水平放置于工作臺(tái)上，有NEST標(biāo)志那一面朝上。
5.前后左右輕輕晃動(dòng)多層瓶，液體會(huì)均勻地分布在五個(gè)生長(zhǎng)面上。
注意事項(xiàng):搖晃的動(dòng)作要輕柔，一方面是防止起泡沫，另一方面是要防止培養(yǎng)基港漏到下層中。
移除培養(yǎng)液
抽吸法
抽吸的時(shí)候，將多層瓶做斜45度，有NEST標(biāo)志的一面朝向自己。
將移液管伸到底部抽吸培養(yǎng)基，直至完全抽吸完。
傾倒法
將有NEST標(biāo)志的一面朝向自己，逆時(shí)針45度傾倒液體。
注意事項(xiàng): 抽吸培養(yǎng)液時(shí)建議使用10 mL移液管，才能將培養(yǎng)液吸盡。
收集細(xì)胞
1.用緩沖液清洗一遍以去除殘留的血清，后加入消化液 (> 5 mL層)，混勻。
2.消化大約2 min (視細(xì)胞情況而定) ，用消化終止液中和消化液
3.采用移液管抽吸法或做倒法將細(xì)胞懸液置于離心管等容器中。
4.用一定量的緩沖液沖洗多層瓶三次，將沖洗液分別置于離心管中,混勻計(jì)數(shù)或者傳代接種。
產(chǎn)品信息
